本发明公开了一种壁虎抗癌提取物，首先将壁虎晾干粉碎，在pH为7.4的缓冲溶液中浸泡12小时，然后加入无水乙醇进行乙醇提取，并对提取液蒸发浓缩，再将浓缩液加入硫酸铵盐析，最后经过透析得到白色絮状物沉淀，将其干燥得到壁虎抗癌提取物。本发明的壁虎抗癌提取物，采用醇提、盐析、透析的方法，从壁虎中提取出具有抗肿瘤作用的多肽分子，使提取物具有很强的抗肿瘤效果，可以作为高效、低毒的抗肿瘤新药物的活性成分。经过试验证明本发明的壁虎抗癌提取物具有很好的抗癌作用，达到了常规抗癌药物氟尿嘧啶和阿霉素的抗癌水平，可以提高机体的免疫力，而且壁虎提取物中含有天然的壁虎多肽，具有毒性低、副作用小的优点。另外本发明的制备方法简单，易于推广应用。