本发明提供一种母兽用微生物发酵无抗生素饲料的制作方法，属于微生物发酵饲料领域。其制作方法所采用的技术方案是在母兽基础日粮中添加经过复苏的发酵菌液进行封闭发酵，所述母兽基础日粮中含有玉米粉、统糠、麸皮、豆粕、桑叶粉、鱼粉、磷酸氢钙、食用盐、复合维生素、微量元素、母兽用预混料等主要成分，不添加对人体和动物有害的药物和化学添加剂，待发酵物料出现微酸香味时，过滤分离发酵渣和发酵液，发酵渣可直接饲喂动物。本发明制作工艺简单，对设备要求低，极易推广；饲料无激素、药物残留，安全环保，适口性好，营养容易吸收，可减少饲料用量，降低养殖成本；减少母兽应激性，改善养殖环境，降低病发率；有利于母兽受精卵的着床率，提高产仔数、产仔质量。