本发明公开了一种黄酮类化合物及其制备方法和应用，所述黄酮类化合物是从豆科山蚂蝗属植物尖叶山蚂蝗(Desmodium？oxyphyllum)的全草中分离得到，命名为山蚂蝗素B，英文名为oxyphyllumflavone？B，其分子式为C₂₂H₁₈O₆，具有下述结构：所述黄酮类化合物的制备方法，是以豆科山蚂蝗属植物尖叶山蚂蝗的全草为原料，经浸膏提取、有机溶剂提取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤。所述应用为该黄酮类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。经对抗烟草花叶病毒的实验，本发明化合物对烟草花叶病毒的抑制率达56.5%，比阳性对照品宁南霉素的抑制率(29.6%)高，具有很好的抗烟草花叶病毒活性。本发明化合物结构简单活性好，可作为抗烟草花叶病毒药物的先导性化合物，有良好的应用前景。