一种检测肿瘤标志物P16抗原表位的氨基酸序列及应用，属于免疫学技术领域，本发明提供了一种肿瘤抑癌基因P16的抗原氨基酸序列。应用P16多肽抗原检测肺癌和食管癌患者血中相应的特异性抗原表位，这种抗原表位可作为肿瘤标志物评估肺癌和食管癌发生的危险度。这种抗原多肽及其抗体可用于制备肿瘤早期诊断试剂和开发治疗肿瘤的靶向药物。